產品問題分析
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影響PCR的因素
PCR法的原理: 循環1: Step1:再含有引物、dNTP及DNA聚合酶的反應液中雙鏈DNA熱變性(94℃,1min) Step2:引物和熱變性生成的單鏈DNA退貨(60℃,1min) Step3:在DNA聚合酶作用下合成互補鏈(72℃,1.5min) 循環2: 擴增的雙鏈再次熱變性生成單鏈DNA(返回step1) (注)不同DNA片段要達到最高的擴增效率,需要設定不同的反應條件。 影響PCR的...
基因組DNA提取常見問題分析
1、未提取到DNA 原因分析: 漂洗液中忘記加無水乙醇 建議解決方案: 第一次實驗時,在漂洗液WB中加入指定量無水乙醇。 2、血液標本中含有血凝塊 原因分析: 不恰當的存放標本,未充分混勻,未使用合適的抗凝收集管 建議解決方案: 丟棄有血凝塊的標本,重新用EDTA、肝素、檸檬酸抗凝管收集血液。 3、紅細胞裂解不完全 原因分析: 血液標本裂解前沒有恢復到室溫 建議解決方案: 處理前先把血液標本恢復到...
DNA純化回收常見問題分析
1、DNA產量低或者純度不高 原因分析: 漂洗液中沒有加無水乙醇 建議解決方法: 第一次實驗時,在漂洗液中加入指定量的無水乙醇。 原因分析: 試劑盒儲存在非最佳條件 建議解決方法: 試劑盒存放在室溫(15℃-20℃)。 原因分析|: 使用了非最佳的洗脫液 建議解決方法: 使用本試劑盒配套的洗脫液。 原因分析: 試劑和回收液沒有充分混勻 建議解決方法: 加入每個試劑后都要充分混勻。 原因分析: 使用...
質粒提取常見問題分析
1、未提取到質粒kDNA或質粒DNA產量低 可能的原因: 培養基中未加入抗生素 建議解決方法: 請確保固體、液體培養基中都加入了適當的抗生素,避免非質粒轉化細胞過度生長。 可能的原因: 細菌培養時間過長 建議解決方法: 將接種過夜培養板的新鮮單菌落,加到含有合適抗生素的培養基中培養12-16小時,避免培養時間過長導致老化細菌裂解。 可能的原因: 細菌培養時間過短 建議解決方法: 細菌培養到[A60...